Z Test FISH to mikroskopowy test chromosomowy w diagnostyce prenatalnej i rakowej raka piersi, żołądka i przewlekłej białaczki limfocytowej. Test, którego wynik jest dostępny w ciągu 1 do 2 dni, może przede wszystkim wykryć nieprawidłowości chromosomalne, które można przypisać zmienionemu zestawowi chromosomów w niektórych chromosomach. Test jest przeprowadzany wyłącznie jako test towarzyszący lub wstępny do szczegółowej analizy chromosomów, której wyniki są dostępne dopiero po 2-3 tygodniach od usunięcia komórek.
Co to jest test FISH?
Test FISH (Fluorescencyjna hybrydyzacja in situ) w diagnostyce prenatalnej pozwala na wyciągnięcie wniosków na temat zmienionego zestawu chromosomów dla niektórych chromosomów. Do wykonania testu FISH potrzeba co najmniej 50 niehodowanych komórek płodowych (komórek owodni), które są pobierane z płynu owodniowego (ok. 2 - 3 ml). Alternatywną metodą pozyskania odpowiednich komórek jest pobranie próbek kosmówki kosmówkowej, w którym komórki pobierane są z miejsca przyczepu pępowiny za pomocą biopsji.
Specjalna procedura pozwala na rozróżnienie poszczególnych nici chromosomów 13, 18, 21 oraz chromosomów X i Y za pomocą kolorów fluorescencyjnych, dzięki czemu możliwa trisomia jest zauważalna dzięki obecności trzech zamiast dwóch homologicznych nici chromosomu . W raku żołądka i piersi test FISH można wykorzystać do sprawdzenia, czy guz ma więcej niż dwie kopie genu HER2 / neu (receptor ludzkiego naskórkowego czynnika wzrostu), co ma konsekwencje dla rodzaju chemioterapii. W przypadku przewlekłej białaczki limfocytowej najczęstsze zmiany chromosomalne w niektórych genach można określić za pomocą kilku analiz testowych FISH w próbkach szpiku kostnego i krwi obwodowej, co również ma wpływ na terapię.
Funkcja, efekt i cele
Chromosomy w izolowanych jądrach komórkowych są zmuszane do rozszczepiania swojej struktury podwójnej helisy poprzez specjalną obróbkę chemiczną lub działanie ciepła, a sondy DNA specyficzne dla chromosomu z odpowiednią komplementarną sekwencją DNA łączą się z „ich” specyficznymi chromosomami. Sondy DNA są oznaczone różnymi kolorami fluorescencyjnymi, dzięki czemu zaznaczone chromosomy można odróżnić od siebie za pomocą specjalnego oprogramowania i policzyć w zautomatyzowanym procesie.
Znane są z. B. Trisomie, w których na jednym chromosomie występują trzy nici zamiast dwóch, Znane są również tak zwane monosomie, w których występuje tylko jedna nić chromosomu X i trzy lub cztery nici homologiczne wszystkich chromosomów. Najważniejsze zmiany chromosomowe, które można wykryć testem FISH w diagnostyce prenatalnej to zespół Ullricha Turnera (monosomia X), zespół potrójnego X (trisomia lub polisomia X), zespół Klinefeltera, w którym lub niektóre komórki somatyczne chłopców mają dodatkowy chromosom X (XXY zamiast XY), zespół Downa (trisomia 21), zespół Edwardsa (trisomia 18) i zespół Pataua (trisomia 13).
Monosomia X, w której dziewczynki mają tylko jeden chromosom X, jest zwykle śmiertelna, co oznacza, że w około 98% przypadków prowadzi do poronienia w ciągu pierwszych trzech miesięcy ciąży. W przypadku, gdyby poród i tak nastąpił, dziewczynki mają normalną długość życia, są przeciętnie inteligentne, ale często cierpią na liczne wady narządów wewnętrznych i są przeważnie bezpłodne. Zespół potrójnego X z zestawem chromosomów XXX) dotyka tylko dziewczynki. Możliwa jest normalna ciąża i poród.
Przeważnie wysokie kobiety z potrójnym chromosomem X mogą żyć normalnie i zwykle nie wykazują żadnych nieprawidłowości fizycznych, chociaż trudności w nauce nie są rzadkie i występują problemy z umiejętnościami motorycznymi. Zespół Klinefeltera, który może dotyczyć tylko chłopców i mężczyzn, charakteryzuje się dodatkowym chromosomem X, który jest obecny we wszystkich komórkach ciała lub tylko częściowo.Cechy fizyczne to ponadprzeciętny wzrost z niezwykle długimi rękami i nogami. Zespół Klinefeltera zwykle prowadzi do zmniejszonego wzrostu jąder przy zmniejszonym uwalnianiu testosteronu.
Zespół Downa, synonim trisomii 21, jest najczęściej związany z określonymi cechami fizycznymi i zaburzeniami poznawczymi. Istnieją różne postacie trisomii 21, z których w ok. 95% przypadków dominuje tzw. Wolna trisomia 21. Trisomia 18 (zespół Edwardsa) w większości przypadków powoduje poronienie, wiąże się z różnymi cechami fizycznymi, a oczekiwana długość życia to zaledwie kilka dni. Trisomia 13 (zespół Pätau) charakteryzuje się również dużą liczbą cech fizycznych i niepożądanych zmian, które często prowadzą do poronień lub martwych urodzeń. Oczekiwana długość życia dzieci w terminie to zaledwie kilka lat.
Celem prenatalnego testu FISH jest wykrycie znanych nieprawidłowości chromosomalnych na wczesnym etapie, aby zaoferować rodzicom alternatywę legalnej aborcji w celu doprowadzenia dziecka do terminu porodu. W przypadku raka piersi i wątroby, raki można sprawdzić pod kątem zwiększonej liczby genu HER2 / neu za pomocą testu FISH. W pozytywnym przypadku następuje zwiększone tworzenie się receptorów czynnika wzrostu, które odpowiadają na niektóre chemioterapie. Dostępne są również testy FISH do identyfikacji specyficznych nieprawidłowości genetycznych w przewlekłej białaczce limfocytowej (CLL), które poprawiają skład skutecznych środków chemioterapeutycznych.
Ryzyko, skutki uboczne i niebezpieczeństwa
Sam test FISH nie wiąże się z żadnym ryzykiem ani niebezpieczeństwem. Jedynie pobranie komórek, które mają być zbadane przez biopsję lub pobranie płynu owodniowego (amniopunkcja), wiąże się z niewielkim ryzykiem infekcji ze względu na jej inwazyjny charakter. Cechą szczególną jest to, że test FISH może ujawnić pewne specyficzne defekty chromosomalne, ale nie można zagwarantować, że w przypadku wyniku ujemnego nie wystąpią aberracje chromosomowe, ponieważ nie wszystkie anomalie można wykryć za pomocą testu FISH. W przypadku pozytywnego wyniku testu należy przeprowadzić dalszą diagnostykę w celu potwierdzenia wyniku lub odrzucenia go jako fałszywego.
.jpg)
