Badanie anneuploidalne

Plik Badanie anneuploidalne służy do określenia liczbowych aberracji chromosomowych w embrionach wytworzonych in vitro, które są przeznaczone do implantacji. Jest to badanie cytogenetyczne, w którym można określić tylko aberracje numeryczne niektórych chromosomów. Badanie przesiewowe w kierunku aneuploidii jest więc formą diagnostyki przedimplantacyjnej (PGD).

Co to jest badanie przesiewowe w kierunku aneuploidii?

Termin „badanie przesiewowe aneuploidii” jest używany do podsumowania metod badań cytogenetycznych, które mogą wskazywać na aberracje liczbowe w niektórych chromosomach w zapłodnieniu in vitro (IVF). Zasadniczo badanie przesiewowe w kierunku aneuploidii może dostarczyć wskazań do nullosomii, monosomii i polisomii, takich jak B. wykonać trisomię.

W przypadku nullosomii całkowicie brakuje pary chromosomów, w monosomii brakuje jednego chromosomu homologicznego z pary chromosomów, aw polisomii występuje więcej niż dwa chromosomy homologiczne dla określonej pary chromosomów. Najbardziej znaną polisomią jest trisomia 21, która prowadzi do zespołu Downa. Ponieważ większość liczbowych aberracji chromosomowych - zwłaszcza monosomii - jest śmiertelna, tj. Prowadzi do naturalnych terminacji, poronień lub urodzenia martwego dziecka, do macicy wszczepiane są tylko zarodki bez rozpoznawalnych aberracji chromosomowych.

Powinno to poprawić wskaźnik powodzenia IVF, ale niektóre aberracje chromosomowe niekoniecznie są śmiertelne, ale prowadzą do nieprawidłowości i poważnych ograniczeń w późniejszym życiu, takich jak zespół Downa lub Turnera. Z tego powodu w niektórych krajach obowiązuje ogólny zakaz lub surowe ograniczenia tego typu diagnostyki przedimplantacyjnej (PGD) ze względów etycznych.

Funkcja, efekt i cele

Badanie przesiewowe w kierunku aneuploidii jest stosowane wyłącznie do zapłodnienia in vitro. Najważniejszym celem jest przeniesienie wyłącznie zarodków bez rozpoznawalnych aberracji chromosomowych do macicy, aby uzyskać jak największą szansę powodzenia ciąży ze sztuczną inseminacją. Zasadniczo można rozróżnić dwie metody diagnostyki ciałka polarnego i badania zarodka przed implantacją. Pierwsza metoda polega na zbadaniu ciał polarnych komórki jajowej, która nie została jeszcze zapłodniona.

Sprawdzana jest tutaj tylko możliwa aneuploidia komórki jajowej. Odbywa się to przy założeniu, że około 90% aneuploidii ma pochodzenie matczyne. Nie jest to PGD w węższym znaczeniu, ale diagnoza przed zapłodnieniem, ponieważ nie doszło do zapłodnienia, czyli fuzji komórki jajowej z plemnikiem. Z drugiej strony badanie przesiewowe aneuploidii na zarodku przed implantacją we wczesnej fazie blastuli kwalifikuje się jako PGD, ponieważ badanie dotyczy „prawdziwego” etapu embrionalnego - nawet jeśli jest to bardzo wczesne stadium, zaledwie kilkudniowe.

W diagnostyce ciał polarnych dwa ciała polarne, które komórka jajowa tworzy podczas pierwszej i drugiej mejozy, zanim połączy się z plemnikiem, są usuwane i badane pod kątem aneuploidii. Tak zwany test FISH (hybrydyzacja fluorescencyjna in situ) służy do określenia wszelkich aneuploidii, które mogą występować. Do tej pory test FISH pozwalał tylko na badanie chromosomów 13, 16, 18, 21, 22 oraz chromosomów płciowych X i Y. Chromosomy struktury podwójnej helisy rozszczepione po mejozie łączą się z odpowiednią komplementarną sekwencją DNA za pomocą sond DNA specyficznych dla chromosomów.

Sondy DNA są oznaczone różnymi kolorami fluorescencyjnymi. Homologiczne chromosomy można policzyć pod mikroskopem świetlnym w procesie półautomatycznym, aby można było zidentyfikować aberracje numeryczne. Analogicznie do diagnostyki ciałka polarnego, badanie przesiewowe aneuploidii przeprowadza się na zarodkach przedimplantacyjnych, które nadal znajdują się we wczesnej fazie blastomeru. Teraz jednak mamy do czynienia z diploidalnymi zestawami chromosomów, których podwójna helisa musi najpierw zostać podzielona, ​​aby zainicjować połączenie chromosomów z komplementarnymi sondami DNA.

Celem badań przesiewowych w kierunku aneuploidii w obu metodach jest pozytywna selekcja komórki jajowej zapłodnionej in vitro przed przeniesieniem jej do macicy w celu uzyskania możliwie największego wskaźnika powodzenia pożądanej ciąży. Często dyskutowany problem etyczny wynika z selekcji negatywnej, która jest automatycznie powiązana z selekcją pozytywną i której niektórzy skrajni krytycy lubią argumentować, aby zbliżyć ją do eutanazji. Kolejny problem etyczny dotyczy stosowania IVF do generowania tzw. Dziecka ratunkowego. Pozytywna selekcja embrionów wytworzonych in vitro może być wykorzystana do hodowli wszechmocnych immunokompatybilnych komórek macierzystych, które mogłyby uratować życie rodzeństwa z niektórymi chorobami poprzez implantację.

Ryzyko, skutki uboczne i niebezpieczeństwa

Samo badanie przesiewowe aneuploidii, jak również ekstrakcja jąder komórkowych, które mają być zbadane, odbywa się poza organizmem i dlatego nie wiąże się z żadnym bezpośrednim ryzykiem ani zagrożeniem dla zdrowia, a zatem jest wolne od skutków ubocznych. Rzeczywiste ryzyko i niebezpieczeństwo polega na tym, że nie osiągnięto jeszcze korzyści z badań przesiewowych pod kątem anoiploidii na blastomerach, tj. Na zarodkach przed implantacją, w zwiększaniu wskaźnika powodzenia w odniesieniu do pożądanej ciąży.

Ogólne, systemowe problemy wynikają z przesadnych oczekiwań co do dokładności wyników badań przesiewowych. Dotyczy to zarówno wyniku pozytywnego, jak i negatywnego. Wynik pozytywny, tj. Stwierdzono co najmniej jedną aberrację chromosomową, wiąże się z pewną niepewnością. Może się zdarzyć, że pozytywny wynik błędnie wyklucza przeszczepienie odpowiedniej komórki jajowej, chociaż w rzeczywistości nie ma defektu chromosomowego. Ten rodzaj błędnej diagnozy w mniejszym stopniu wynika z samej procedury, niż z faktu, że zarodki w stadium blastuli mogą mieć kilka komórek z aberracjami chromosomowymi.

Z drugiej strony przyszli rodzice dziecka IVF nie mogą być pewni, że jeśli wynik testu na aneuploidię jest ujemny, to w rzeczywistości nie ma aberracji chromosomalnej. Inne niebezpieczeństwo pojawia się, gdy z zarodka zostanie usunięta niezbędna liczba komórek. Zdarza się, że komórki pobrane podczas biopsji umierają i nie można ich już zbadać. Ponieważ biopsji nie można już powtórzyć na tym samym zarodku, nie jest ona już dostępna do przeszczepu, ponieważ nie ma wyniku testu. Omówiono również, w jakim stopniu biopsja wpływa na płodność zarodka, tak że wpływa to na ogólny wskaźnik powodzenia ciąży.